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舜宇恒平符合國(guó)標(biāo)的三聚氰胺快速液相色譜檢測(cè)法

點(diǎn)擊次數(shù)：2805 更新時(shí)間：2009-01-22

上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司按照GB/T 22400-2008 《原料乳中三聚氰胺快速檢測(cè)　液相色譜法》，對(duì)鮮牛奶中三聚氰胺進(jìn)行快速檢測(cè)，經(jīng)優(yōu)化色譜條件，三聚氰胺的出峰時(shí)間在7min左右，并能與雜質(zhì)峰達(dá)到基線分離，完整分析一個(gè)樣品（包括前處理）的整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程在20min以內(nèi)。

1.儀器與試劑

LC1620液相色譜儀（含UV1620紫外-可見檢測(cè)器1臺(tái)，P1620高壓恒流泵1臺(tái)，上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司）；FA2004電子分析天平（上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司）；三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品（>99%，上海安譜）；磷酸二氫鉀（分析純）；磷酸（分析純）、乙腈（色譜純，美國(guó)Tedia）、二次蒸餾水。

2.標(biāo)準(zhǔn)品溶液配制

精密稱取三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品，溶于水，配制成1.0mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，于4℃避光保存。根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要，用流動(dòng)相逐級(jí)稀釋成適當(dāng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液。

3.樣品前處理

稱取15g樣品于50ml具塞離心管中，加入乙腈30ml，劇烈震蕩6min，加水至滿容刻度，充分混勻后靜置3min，取上清液，0.22um濾膜過(guò)濾，作為HPLC測(cè)定溶液。

4.色譜條件：

色譜柱：Venusil SCX 5μm（ID4.6mm×250mm）

流動(dòng)相：乙腈/緩沖鹽=30/70（緩沖鹽：80mM磷酸緩沖液，用磷酸調(diào)pH3.0）

流速：1.5ml/min

波長(zhǎng)：240nm

進(jìn)樣量：20μl

5.精密度實(shí)驗(yàn)

取濃度為2μg/mL三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)工作液，按上述色譜條件，連續(xù)進(jìn)樣6次，以各成分峰面積計(jì)算RSD（%），所得結(jié)果如表1所示：保留時(shí)間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為0.10％，峰面積RSD為0.69％。

表1 精密度實(shí)驗(yàn)

NO.	Retention time（min）	Peak High	Peak Area
1	7.240	1060	9854.7
2	7.232	1062	9815.3
3	7.223	1043	9805.0
4	7.223	1088	9869.5
5	7.223	1052	9681.4
6	7.223	1070	9841.3
RSD（%）	0.10	0.96	0.69

圖1 三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖

6.標(biāo)準(zhǔn)曲線

1）配置濃度分別為0.2、0.5、2.0、5.0、20.0、50.0μg/mL的三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)工作液。將以上6種標(biāo)準(zhǔn)工作液在上述色譜條件下按濃度由低至高進(jìn)樣。以對(duì)照品濃度（橫坐標(biāo)X軸，μg/mL）對(duì)峰面積（縱坐標(biāo)Y軸）進(jìn)行線性回歸，求算標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果如下：

y = 4810.3x + 137.52 r = 0.9999

2）配置濃度分別為0.005、0.01、0.02、0.5、0.2μg/mL的三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)工作液。將以上5種標(biāo)準(zhǔn)工作液在上述色譜條件下按濃度由低至高進(jìn)樣。以對(duì)照品濃度（橫坐標(biāo)X軸，μg/mL）對(duì)峰面積（縱坐標(biāo)Y軸）進(jìn)行線性回歸，求算標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果如下：

y = 4116.2x + 17.618 r＝0.9992

7.加樣回收率和重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)

取已知三聚氰胺含量的牛奶樣品，加入一定量的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，按“樣品前處理” 操作，平行制備3份，得到樣品溶液后按上述色譜條件進(jìn)樣分析，得到加樣回收率及重現(xiàn)性結(jié)果，三次測(cè)定RSD為1.89％，加樣回收率為100.6％。

圖2 空白牛奶樣品色譜圖

圖3 加標(biāo)牛奶樣品色譜圖

8.檢測(cè)限及定量限

依據(jù)噪聲值，按3倍信噪比，計(jì)算三聚氰胺的理論檢出限，為0.04 mg/kg。

具體內(nèi)容進(jìn)行咨詢。

上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司是上海市高新技術(shù)企業(yè)，專業(yè)致力于各類科學(xué)儀器的研發(fā)、制造和銷售。公司與多所高校、科研機(jī)構(gòu)建立了密切的合作聯(lián)盟，多次承擔(dān)上海市科委科學(xué)儀器攻關(guān)項(xiàng)目，已成為科學(xué)儀器的產(chǎn)學(xué)研自主創(chuàng)新基地。公司已形成在四大領(lǐng)域，即分析儀器、天平儀器、物性測(cè)試儀器和前處理儀器共計(jì)一百多個(gè)品種的數(shù)字化、智能化產(chǎn)品，建立了與顧客的營(yíng)銷網(wǎng)絡(luò)，客戶遍及海內(nèi)外。

若要了解上海舜宇恒平儀器有限公司更多的產(chǎn)品及實(shí)驗(yàn)室解決方案，敬請(qǐng)致電，發(fā)送郵件至info@hengping.com或訪問(wèn)www.hengping.com

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